森の里ホームズのブログ

トランスフェクション(transfection)

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 トランスフェクション(transfection)とは核酸を動物細胞内へ導入する過程を指す。通常、動物細胞はウイルスによる導入以外は核酸の細胞内導入は滅多に起こらないが、人為的にある程度自由に核酸を導入する事が可能になってきている。

広義では、トランスフェクションとは、ウイルス感染以外の方法で核酸(DNAまたはRNA)を細胞に人為的に導入するプロセスを意味します。このような外来核酸の導入には様々な化学的手法、生物学的手法、または物理的手法が用いられ、それによって細胞の特性が変化することで、遺伝子機能および細胞内におけるタンパク質の発現に関する研究が可能になります。

トランスフェクションには、導入された核酸は細胞内に一過的に存在し、限られた期間のみ発現し複製されないタイプと、導入された核酸は安定で 、宿主ゲノムに組み込まれ宿主のゲノムが複製される際に複製されるタイプがあります。

<出典:Wikipedia>

 ■ 真核生物の細胞に外来DNAを導入
 真核生物の細胞に外来DNAを導入するには様々な方法がある:物理的処理(エレクトロポレーション、細胞の圧迫、ナノ粒子法、磁気粒子法 )や化学物質や生物学的粒子(ウイルス)による方法など。 遺伝子の送達は、例えば、遺伝子治療および作物の遺伝子改変に必要なステップの1つである。 細菌から哺乳動物への様々なタイプの細胞および組織のために開発された多くの異なる遺伝子送達の方法が存在する。遺伝子の送達方法は、非ウイルス性およびウイルス性の2つのカテゴリーに分類することができる。 非ウイルス性の方法には、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、パーティクル・ガン法、インペールフェクション、静水圧負荷、連続注入、ならびにリポソームベクターを利用する脂質媒介DNAトランスフェクションプロセスであるリポフェクションのような超音波処理及び化学物質など、物理的方法が挙げられる。 また、高分子遺伝子担体(ポリプレックス)の使用も物理的方法に含まれる。 一方、ウイルスによる遺伝子導入方法は、ウイルスがDNAを宿主細胞内に注入する能力を利用する。 導入される遺伝子は、複製不能にされたウイルスに詰められる。今日までに、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、パラミクソウイルス および単純ヘルペスウイルスが使用されている。しかしウイルスを使用し遺伝子を細胞内に送達する方法には欠点がある。 ウイルスが細胞内に送達することができるのは非常に小さなDNA片のみであり、多くの手作業を必要とし挿入部位がランダムなこと、また細胞変性効果及び突然変異を誘発する危険性などが問題である。

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