高山清洲・世界平和 人類みんな兄弟

世界平和に導く為の語録

第4回WCH(仮称)超党派議員連盟総会勉強会 2024/02/27

2024-03-18 00:05:00 | 愛国者

原口一博衆議院議員の命を掛けた叫び声を日本人よ良く聞け!!

【生配信】WHOパンデミック合意あと4ヶ月 原口一博衆議院議員インタビュー(1/4)我那覇真子さんと対談 2024/02/02

第3回WCH(仮称)議連総会振り返り 共同代表原口一博  アドバイザー 井上正康先生、村上康文先生、林千勝先生 2024/01/25

第4回WCH(仮称)超党派議員連盟総会勉強会 2024/02/27

 

このありさまを見よ!!

4月からの新型コロナウイルスワクチンの「定期接種」(65歳以上の高齢者と60~64歳で基礎疾患がある人が対象)について、厚生労働省は15日、自己負担額が7000円程度になるよう、市町村に助成金を支給すると発表した。

 ただ、国の助成以外に市町村が独自に補助する場合があるため、実際の自己負担額は市町村ごとに異なる。

 厚労省によると、2月に新型コロナワクチンの各メーカーに価格を聞き取ったところ、注射にかかる費用を含めて1人あたり1回1万5300円ほどだった。

このうち、国は2024年度に8300円を市町村に支給することにした。25年度以降も助成を続けるかは未定という。

 新型コロナワクチンは3月末まで無料で接種が受けられるが、4月からは定期接種となり、秋から冬にかけて年1回が予定されている。

一方、65歳未満で健康な人は4月以降、費用が全額自己負担となる「任意接種」の扱いになる。

国の助成は適用されず、費用は医療機関などによって異なる見通し。

 生活保護の受給者など低所得者は、無料で接種を受けられるよう、国が市町村に交付金を出す。


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第202回 日本の賃金が低いのはハイパー野郎と日銀のせい

2024-02-14 00:05:00 | 愛国者

なぜ世界中で日本だけ30年間も賃金上がらないのか?

戦犯は、財務省と日銀である!!

一般の国民は知らないだろうが、日本の政財界の頂点に君臨するのは「財務省」なのである!!

財務省こそが、アメリカの手先となり国民の血税を搾り取る売国奴である!!

また日本国に「日銀」なんていらない!!

ただの株式会社が「円」を印刷し、「ゼロ金利」を推進して日本経済を疲弊させている張本人である!!

 

日本経済は30年前「実質世界一の経済大国」であった!!

30年前は「ジャパンマネー」が世界経済を席巻しており、世界は戦々恐々としていましたし、アメリカのビジネスセンターのビルを買いまくっていました!!

これに恐れをなしたのが「日本占領」をしていたアメリカです!!

慌て「日本経済」の崩壊を占領軍と売国奴政治家たちに指示したのです!!

そこで売国奴と財務省が「消費税」と「米国債買取」を発案し実行して、今日に至っているのです!!

いつになったら賃金はチャンと上がるんでしょうか?

身の回りの物価がドンドン上がる中で、賃金は上がらず暮らしは厳しくなる一方です。
こうした中、政府は「構造的な賃上げ」というキーワードで賃上げ政策を進めようとしていますが、その裏で消費税15%を決定しています!!

なぜ日本だけ30年間も賃金上がらないのか?

【解説】なぜ私たちの賃金は上がらない? 今の方法では“生ぬるい”ワケ

第202回 日本の賃金が低いのはハイパー野郎と日銀のせい

日本経済崩壊を目的として、今年は「天変地異」、「大地震」、「ウイルス」が、日本の国土をボロボロにしてしまいます!!

日本人よ!!

いつまで泣き寝入りするつもりなのか!!

まだまだ甘くありません!!

致死率100%のコロナウイルスが、中国からやってきます!!

「人工地震」と指向性エネルギー兵器」の攻撃!!

次は、生物兵器の散布を洗礼!!

インフルエンザが大流行しています!!

ホルムズ海峡封鎖で日本経済は大打撃!!

次は「緊急事態条項」の施行です!!

アメリカも、イスラエルも、資金が必要なんです!!

植民地の日本から奪うしかないんですよ!!

不穏分子は、ウクライナかイスラエルへ送られて軍に編入させられて「戦死」だね!!

「全てを奪いつくして何も持たせずに死なせてやれ!!」

今、中流家庭の資産調査を財務省がしています!!

貴方の銀行預金とタンス預金がDSに狙われています!!

新円切り替え!!金融商品の暴落!!金の暴落!!

証券会社や銀行で、金融商品や株に変えても履歴が残りますから追跡されてすべて奪われてしまいます!!

新紙幣に切り替え!! 預金封鎖!! デジタル通貨!!

で貴方は、必ず全ての資産を失ってしまいます!!

それも年末までにです!!

中級家庭の資産は、すべて奪われてしまいます!!

上級国民になり~

DSも手の出せない唯一の資産防衛があります!!

ご希望の方はFAX042-361-9202まで!!

メルカリの株が10ケ月で、100倍に成り3人だけが買って100万円が1億円になりましたが、夢よ再びとばかりに暴騰する株が出ました!!

希望の方は・・・042-361-9072まで!!

ここまで

自分どころか家族さえも、守りません!!

コロナを証明した論文はありません!!新型コロナは存在しません!!

ワクチンには予防効果、発症効果、重症化を防ぐ効果もありません!!

ワクチンの中身の正体は

酸化グラフェンによる血栓と、M-RNA修飾ウリジンを使った遺伝子組み換えで免疫破壊兵器です!!

ワクチンや食品に含まれる社会毒を排泄、無毒化する!!

松葉茶・ヨモギ茶・琵琶種粉末・ムクナ豆粉末・非加熱の塩・味噌

ビタミンB2・ビタミンC・ビタミンE・コエンザイムQ10・フルーツ

納豆・ニンニク・ゆで卵・ゴーヤ・トマト・ブロッコリー・クルミ

きのこ類・梅干し・胡麻ナッッ・オリーブオイル・寒天・アーモンド・シソ・ショウガ・ワサビ・沢庵・ヌカズケ・海藻類・ヌカズケ

シソ・ショウガ・ワサビ・沢庵・

nRNAワクチン汚染は、想像以上に深刻です!!

スパイク蛋白質が人類の免疫力を削いで成人病を引き起こさせて次に「癌」にしてしまう!!

コロナデトックスは~

納豆キナーゼ・ブロメライン・クルクミン

病原体を説明することが出来ないものに対してワクチンを作れません!!

政府厚生労働省マスコミ医師会のいうことは全ては嘘なのです!!

スパイク蛋白質を体内から除去して発症を遅らせるのは

納豆キナーゼ・ブロメライン・クルクミン

マイケル・イードン博士(元ファイザー社副社長)

初回接種者の内0.8%は、2週間以内に死亡する。

即死しなかったとしても、接種者の見込み寿命は2年である。

生きながらえる期間は、長く見積もっても3年である!!

国内の企業の皆様に、国連に加盟しています
 ・海外の政府
 ・海外の企業
をご紹介します。
ご要望の方はFAXにて、ご連絡してください。
 国際政治経済文化研究会 FAX042-361-9202

 

 


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「タルタリア帝国」歴史から消されてしまった国?

2023-12-02 00:05:00 | 愛国者

「タルタリア帝国」歴史から消されてしまった国?

タルタリア文明の特徴 タルタリア文明は、その特異な建造物や芸術作品、技術的な進歩などで知られています。

この文明の人々は、高度な都市計画を持つ都市を築き、洗練された陶磁器や美しい装飾品を制作していました。

特に、独自の文字や言語を持つことが示唆されており、その解読が今もなお試みられています。

「タルタリア帝国」実存の痕跡 ~歴史から消されてしまった国~

200年前に完全に消されてしまった国【誰も知らないタルタリア帝国】

フラットアース(=地球は丸くない、平面である)に引き続き、支配者層たちがみんなに知られたくないこと。

ずっと隠されて、歴史から消された国がありました。

マッドフラッド タルタリア文明の巨人たち 絵画や写真に残る巨人の痕跡 - YouTube
歴史から完全に消された国

13世紀〜18世紀初頭に存在した
タルタリア帝国」です。

歴史の教科書にはもちろん出てこないし
初めて聞く人も多いと思います。

なぜ消されてしまったか?

シュタイヤー on Twitter: </div> </div> </div> </figure> <p id="WJgtl">ムーやアトランティスも高度だったらしいですが・・・</p> <h2 id="76Hxm">200年前まで?</h2> <p id="W2JoI"><br id="bi0Tn">フリーエネルギーが当たり前で、<strong>自動車や飛行機、鉄道、動く歩道</strong>ですらすでにあったようです。</p> <p id="m3wJq">産業革命も結局は、タルタリア文明の技術を再発見しただけ。</p> <p id="Z8hJs"><span style="font-size: 18px; color: #008000;">タルタリア帝国は、<strong>1812年頃 id="uzNfY"> 【タルタリア帝国】<br target="_blank" id="NCflW">【フリーエネルギー】 <br target="_blank" style="color: #ff0000;">どうやって歴史を消したのか??</span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><img src="https://stat.ameba.jp/user_images/20220620/07/tama8543/f4/7c/j/o0900062015135530965.jpg" alt="タルタリア文明、空飛ぶピラミッド 1840年 | たまきちのブログ" width="447" height="308" id="4CU5E"><br id="rRG2z">そして1800年前後、世界各地のタルタリア文明を<strong>核爆弾</strong>で根こそぎ滅ぼしました。</p> <p id="FEui1">核兵器は1930年に開発されたことになっていますが、すでにあったようです。</p> <p> </p> <p id="Ltzb9">ロシアにはその時にできたクレーターが無数に存在します。</p> <p id="xGBG5"><strong>半世紀後</strong>。孤児たちを世界各地に送り込む(放射線量が安全になってから) </p> <p><strong><br id="Bpimz">孤児たちは、嘘の歴史を教えられているし、<strong>親もいないから、真実を聞けない</strong></p> <p id="lm6s2"><br id="8Fntg">彼らの手口は、容赦ない&頭がいい、というかずる賢い・・・</p> <p id="AXvNx"><br id="P7Pia">たくさんの人が亡くなるし、生き残ったとしても<strong>作物が取れない</strong>から飢える、放射能で被爆してしまう…</p> <p id="MsUd4">日本もその影響で大飢饉が起こっています。。</p> <p id="kVAbE">なぜ、ロシアや中国が閉ざされた国なのか、理由が分かった気がしませんか?</p> <p id="gEH9O"> </p> <p id="C4slT">ムーvsアトランティスを含め、今まで何回か同じことをやってるんじゃないかな。</p> <p>今もワクチンでやられているんだけど、ほとんどの人が眠ったままですね。</p> <p id="gcKNc"><br id="xljUs">まぁもう思い通りには行かなくなると思います。<br id="dsC6L">フリーエネルギーの跡としてきれいに残っているのは北海道の函館にある<strong>五稜郭</strong>ぐらいでしょうか…</p> <figure id="C68E5A93-4EB3-4E48-A3A5-9B314E4E73C6"><a class="is-slide" src="https://assets.st-note.com/production/uploads/images/65429315/picture_pc_87117176654bc039ce378bccbcf3bc83.png?width=800" alt="画像1" width="474" height="353" data-modal="true" id="zHCWG"> </p> <figure id="5439DCC7-DE2B-4B00-92AC-CC4C8920A2D7"></figure> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">いよいよ年末から始まります!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">今、中流家庭の資産調査を財務省がしています!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #800080;"><strong><span style="font-size: 24px;">貴方の銀行預金とタンス預金がDSに狙われています!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">新円切り替え!!</span></strong></span><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">金融商品の暴落!!</span></strong></span><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">金の暴落!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">預金封鎖!!</span></strong></span><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">デジタル通貨!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #800080;"><strong><span style="font-size: 24px;">で貴方は、必ず全ての資産を失ってしまいます!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #800080;"><strong><span style="font-size: 24px;">それも年末からです!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #800080;"><strong><span style="font-size: 24px;">中級家庭の資産は、すべて奪われてしまいます!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">DSも手の出せない唯一の資産防衛があります!!</span></strong></span></p> <p><span style="color: #ff0000;"><strong><span style="font-size: 24px;">ご希望の方はFAX042-361-9202まで!!</span></strong></span></p> <div class="video-clear-div"> <div class="article-box-gray"><span style="font-size: 18px;"><a target="_blank"><span style="color: #008000;"><span style="color: #0000ff;"><strong>ここまで</strong></span></span></a></span></div> <div class="mainbox"> <div id="nocopy"> <div class="entry-content"> <p><span style="color: #ff0000; font-size: 18px;"><strong>自分どころか家族さえも、守りません!!</strong></span></p> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="font-size: 18px;">コロナを証明した論文はありません!!新型コロナは存在しません!!</span></p> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="font-size: 18px;">ワクチンには予防効果、発症効果、重症化を防ぐ効果もありません!!</span></p> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="color: #ff0000; font-size: 18px;"><strong>ワクチンの中身の正体は</strong></span></p> </dt> </dl> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="color: #ff0000; font-size: 18px;"><strong>酸化グラフェンによる血栓と、M-RNA修飾ウリジンを使った遺伝子組み換えで免疫破壊兵器です!!</strong></span></p> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="color: #800080; font-size: 18px;"><strong>ワクチンや食品に含まれる社会毒を排泄、無毒化する!!</strong></span></p> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> <div class="video-clear-div"> <div class="mainbox"> <div id="nocopy"> <div class="entry-content"> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="color: #ff6600; font-size: 13px;"><strong>松葉茶・ヨモギ茶・琵琶種粉末・ムクナ豆粉末・非加熱の塩・味噌</strong></span></p> <p><span style="color: #ff6600; font-size: 13px;"><strong>ビタミンB2・ビタミンC・ビタミンE・コエンザイムQ10・フルーツ</strong></span></p> <p><span style="color: #ff6600; font-size: 13px;"><strong>納豆・ニンニク・ゆで卵・ゴーヤ・トマト・ブロッコリー・クルミ</strong></span></p> <p><span style="color: #ff6600; font-size: 13px;"><strong>きのこ類・梅干し・胡麻ナッッ・オリーブオイル・寒天・アーモンド・シソ・ショウガ・ワサビ・沢庵・ヌカズケ・海藻類・ヌカズケ</strong></span></p> <p><span style="color: #ff6600; font-size: 13px;"><strong>シソ・ショウガ・ワサビ・沢庵・</strong></span></p> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p><span style="color: #800080; font-size: 13px;"><strong>nRNAワクチン汚染は、想像以上に深刻です!!</strong></span></p> <p><span style="color: #800080; font-size: 13px;"><strong>スパイク蛋白質が人類の免疫力を削いで成人病を引き起こさせて次に「癌」にしてしまう!!</strong></span></p> <p><span style="color: #a31b0d; font-size: 13px;"><strong>コロナデトックスは~</strong></span></p> <p><span style="color: #008000; font-size: 13px;"><strong>納豆キナーゼ・ブロメライン・クルクミン</strong></span></p> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> <article> <div class="mod-entry-set"> <div class="entry"> <div class="entry-body"> <div class="entry-body-text"> <p><span style="color: #8b4512; font-size: 13px;"><strong>病原体を説明することが出来ないものに対してワクチンを作れません!!</strong></span></p> <p><span style="color: #8b4512; font-size: 13px;"><strong><span style="color: #ff0000;">政府厚生労働省</span>と<span style="color: #ff0000;">マスコミ</span>と<span style="color: #ff0000;">医師会</span>のいうことは全ては嘘なのです!!</strong></span></p> <p><span style="color: #a31b0d; font-size: 13px;"><strong>スパイク蛋白質を体内から除去して発症を遅らせるのは</strong></span></p> <p><span style="color: #008000; font-size: 13px;"><strong>納豆キナーゼ・ブロメライン・クルクミン</strong></span></p> <p><span style="font-size: 13px;"><strong><span style="color: #ff0000;">マイケル・イードン博士(元ファイザー社副社長)</span></strong></span></p> <p><span style="color: #008000; font-size: 13px;"><strong>初回接種者の内0.8%は、2週間以内に死亡する。</strong></span></p> <p><span style="color: #008000; font-size: 13px;"><strong>即死しなかったとしても、接種者の見込み寿命は2年である。</strong></span></p> <p><span style="color: #008000; font-size: 13px;"><strong>生きながらえる期間は、長く見積もっても3年である!!</strong></span></p> <div class="sharing" data-title="トランプを治療した主治医、命がけの発言!"> <article id="post-3367" class="art"> <div class="art-body article-body"> <div class="the-content"> <div class="entry-content"> <blockquote> <div class="twitter-tweet twitter-tweet-rendered"> <div class="entry-content"> <div class="content-wrap incontainer clearfix not-home singular"> <div id="content" class="content two-col right"> <article id="post-10086" class="single-article post-10086 post type-post status-publish format-standard has-post-thumbnail category-health"> <div class="entry entry-content"> <div class="main__detail"> <div class="main__detailMain"> <div id="js-detailBody" class="main__article js-nordot_beacon-main_article"> <div class="main__articleBody"> <article class="ma"> <div class="gE iv gt"> <div class="o9v6fnle cxmmr5t8 oygrvhab hcukyx3x c1et5uql ii04i59q"> <div dir="auto"> <div class="blue"> <div class="DIV"> <div id="diaryScrollContent"> <div class="article"> <div class="lo"> <div class="js-hashtag hashtag-module-wrapper"> <div class="hashtag-module hashtag-module-borderTop"> <div class="DIV"> <div id="diaryScrollContent"> <div class="article"> <div class="lo"> <div class="js-hashtag hashtag-module-wrapper"> <div class="hashtag-module hashtag-module-borderTop"> <div class="qna-mf"> <div class="css-1dbjc4n r-xoduu5 r-1mlwlqe r-1d2f490 r-1udh08x r-u8s1d r-h9hxbl r-417010" title="疲れた顔"> <div class="articleContents"> <div class="clearfix"> <div class="clearfix"><strong><a class="css-4rbku5 css-18t94o4 css-1dbjc4n r-1loqt21 r-1ny4l3l" data-focusable="true"><span style="color: #ff0000;">誘拐された子供たちを救出する協議会 </span></a></strong></div> <div class="clearfix"><strong>今、立ち上がり家族を守れ!!</strong></div> <div class="clearfix"><strong>日本国自立なくして、子供たちの輝かしい将来はない!!</strong></div> <div class="clearfix"><strong><a class="css-4rbku5 css-18t94o4 css-1dbjc4n r-1loqt21 r-1ny4l3l" data-focusable="true">電話番号042-365-2728</a></strong></div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </article> </div> </div> </div> </div> </div> </article> </div> </div> </div> </div> </blockquote> </div> </div> </div> </article> </div> </div> </div> </div> </div> </article> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> </div> </div> </div> </div> </dt> </dl> </dt> </dl> <dl class="qaWrap open"> <dt> <dl class="qaWrap open"> <dt> <p> </p> </dt> </dl> </dt> </dl> </dt> </dl> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </div> </article> </div> <div class="p-article__share"> <div> <div class="o-shareBooster p-article__shareBooster is--active"> <div class="o-shareBooster__inner"> <div class="o-shareBooster__share"> 


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日本国民よ立ち上がれ!!小さな一歩がやがて世界を変える新しい日本を築くための一歩となる!!

2023-11-20 00:05:00 | 愛国者

日本国民よ立ち上がれ!!小さな一歩がやがて世界を変える新しい日本を築くための一歩となる!!

今の日本の有様を見よ!!

経済は変動しないのに株が上下し、景気が上下する変動経済!!

投機筋が操る架空の操作経済!!

これ等は偽経済であるというのに、乱高下する経済に国民は恐れおののき右往左往し途方に暮れているが、誰も真実を国民に教えない!!

国民が働いて生活する固定経済は、まったく変わらないというのに・・・

 

銀行もゼロ金利のために顧客の資金を狙って金融商品を売りつける!!

銀行の本来の仕事は、日本経済を拡大するためにあるというのに老人や身障者の資金を狙い丸裸にしてしまう!!

詐欺師、強盗の類となり果てている!!

それにしても恐るべき国体へと変貌してしまった日本国・・・

何もかもがあふれかえってはいるが・・・

食品添加物とは?種類や役割、デメリットまで詳しく解説 | Earth Family(アースファミリー)公式サイト

日本の食品添加物は1500種以上 食品衛生法の施行当時、食品添加物は安全が確認された60種類のみでしたが、現在では厚生労働省が指定する指定添加物466品目のほか、昔から使用されていて安全性に問題がないと認められている既存添加物357品目、植物や動物などが原料の天然香料が約600品目、食品が添加物として使用されているものが約100品目と、1500以上の食品添加物が使用されています。

世界の食品添加物認可数の比較 ・アメリカ:133種類 ・ドイツ:64種類 ・フランス:32種類 ・イギリス:21種類 ・日本:約1500種類

食品添加物大国の日本!

海外で禁止されている危険な添加物が日本国内を平然と流通しています!!

トウモロコシはアメリカ国内では流通禁止で日本にすべて流入 に対する画像結果

例えばトウモロコシはアメリカ国内では流通禁止されていますが、アメリカで生産されているトウモロコシの大半が日本にすべて流入しているのですから恐ろしい!!

【体に有害】体に悪い食品添加物ランキングベスト5【体に良い無添加商品もご紹介】

体に悪い食品添加物が国民の間に大量に流通しているために、日本国民の間に癌患者が激増しています!!

14年前に9万人であった癌患者が、昨年は450万人です・・・・

世界では癌患者が激減しているというのに!!

世界は嘘から嘘に包まれています!!

大気の問題がそうです!!

以前は「フロンガス問題」でしたが最近は「二酸化炭素問題」に成っていますが実は「亜酸化窒素問題」なんですね!!

亜酸化窒素は、二酸化炭素問題の40倍も大気に放出されて地球のオゾン層を破壊しています!!

亜酸化窒素(N2O: Nitrous Oxide)は、二酸化炭素(CO2)の約310倍の効果を示す温室効果ガスであり、オゾン層を破壊する気体でもあります。

地球環境のN2Oの75%以上は土壌中のカビや細菌などの微生物が産生します。

しかし、そのN2O発生の分子機構は、20年以上未解明なままでした。


 今回、兵庫県立大学大学院理学研究科の城宜嗣教授、久保稔教授、理化学研究所放射光科学研究センターの當舎武彦専任研究員、広島市立大学大学院情報科学研究科の鷹野優教授らを始めとした共同研究グループは、微生物によるN2O産生の主役である一酸化窒素還元酵素(NOR: Nitric Oxide Reductase)に着目し、N2O産生の分子機構を、SACLAを用いた無損傷結晶構造解析時分割赤外分光法の最先端の計測手法を組み合わせることにより、原子・電子レベルで解明することに成功しました。

この研究成果により、今後、微生物によるN2Oの排出を抑制する研究が進展していくことが期待されます。

背景
 亜酸化窒素(N2O: Nitrous Oxide)は別名笑気(Laughing Gas)とも呼ばれ、麻酔にも使われる非常に安定な気体です。

しかしその安定性ゆえに、発生すると地球の大気中に拡散し、太陽光に含まれる赤外線を吸収するので、温室効果ガスとなります。

地球上のN2O発生量は、温室効果ガスとしてよく知られる二酸化炭素CO2の数千分の一程度ですが、その温室効果はCO2の約310倍であり、地球温暖化の観点から無視できません。

さらに厄介なことに、N2Oが地球の大気圏の外である成層圏にまで拡散すると、紫外線などにより窒素酸化物(NOx)に変化します。

NOxは非常に反応性に富み、地球を取り囲むオゾン層を破壊します。

1970年代にオゾン層破壊の原因物質としてフロンが注目され、その使用が規制されて以降、N2Oがオゾン層破壊の主要因となっています。

このように、N2Oは21世紀の地球環境保全を考える上で鍵となる気体の一つと指摘されてきました。


 N2Oは、工場や車の排ガスや燃焼ガス、動物の糞尿などからも発生しますが、N2O発生の75%以上は農業が原因と言われています。

肥料として播く窒素化合物を、土壌中のカビや細菌などの微生物が分解する過程でN2Oが産生されるためです。

このような生物的過程を「脱窒(Denitrification)」といいます。

脱窒は土壌中など酸素の無い環境に生息する微生物の嫌気呼吸の一種で、硝酸イオン(NO3-)や亜硝酸イオン(NO2-)が逐次分解される過程です(NO3- → NO2- → NO → N2O → N2)。

脱窒の中間生成物として産生されるN2Oが大気中に漏れ出ることになります。

脱窒の各ステップは微生物が持つ金属酵素によって触媒されていますが、最終過程(N2O → N2)を触媒する金属酵素を持たない微生物もあり、その場合はN2Oが最終産物となります。


 N2O発生、すなわち一酸化窒素(NO: Nitric Oxide)をN2Oに変換する過程は、鉄(Fe)を活性中心に含む酵素である一酸化窒素還元酵素(NOR: Nitric Oxide Reductase)によって触媒されます。

この酵素反応は、2NO + 2H+ + 2e- → N2O + H2O です。

NOは非常に反応性の高い気体であり、微生物の体内に留まると微生物自身が死滅してしまうので、脱窒の中間生成物として作られるNOを速やかにN2Oに変換し無毒化するNORは、脱窒を行う微生物にとって無くてはならない酵素です。


 本研究で研究対象にした脱窒カビFusarium oxysporumのNORについては、約40年前に筑波大学の祥雲弘文助教授(現在、東京大学名誉教授)が発見し、25年前に本研究の主著者の一人である城教授が、当時の計測技術を駆使して、そのN2O産生機構のアウトラインを提案しました。

この酵素反応中には数百ミリ秒という非常に短時間だけ反応中間体が現れます。

N2Oが産生されるメカニズムを確定する上で非常に重要であるとの認識から、この25年間、この反応中間体の構造と電子状態は世界中で研究されてきました。

これまでに4つの可能性が提案されていましたが、既存の測定技術では、その構造を確定できる決め手がありませんでした。

図1. 提案されていたN2O産生機構

図1. 提案されていたN2O産生機構。

研究手法と成果
 NORの反応中間体のように非常に短寿命な状態の構造・電子状態を決定するためには、実際に反応している最中の酵素を観測しなければなりませんでした。

そのために共同研究グループは、紫外光を照射するとNOを放出するケージド化合物(注4)を反応開始剤として利用し、その直後に現れる反応中間体の構造解析にX線自由電子レーザーSACLAを光源とした無損傷X線結晶構造解析法を、電子状態の解析には時分割赤外分光法を用いました。


 まず、酵素反応前のNORの結晶に紫外光を照射し、目的の反応中間体が現れた瞬間にそれを瞬時に凍結する装置を開発することで、NORの反応中間体を結晶状態で捉えることに成功しました。

この反応中間体の結晶を用いて、SACLAの最先端技術、すなわち反応性の高い不安定な構造を無損傷で解析した結果、反応開始前は直線状だったNOの鉄(Fe)への配位構造(∠Fe-N-O = 158°)は、反応中間体では大きく折れ曲がった特殊な構造(∠Fe-N-O = 138°)へと変化していることが判明しました。
 一方、短寿命の反応中間体の電子状態の測定は、従来の赤外分光装置では全く困難でした。

そこで、これを可能とするために、共同研究グループは、フェムト秒赤外パルスレーザーを光源とする分光装置と、マイクロ流路デバイスを組み合わせることで、NORの酵素反応を連続的に追跡できる新しい時分割赤外分光装置を開発しました。

この独自開発した装置によって、世界で初めてNOR反応の短寿命反応中間体の赤外分光スペクトルを得ることに成功しました。

このスペクトルデータを詳細に解析し、前述の構造データと合わせて、さらに量子化学計算を併用することで、遂にNORの反応中間体の電子状態が、今まで提案されていた4つの状態の中の『Fe3+-NHO•-』であることを明らかにしました。

この状態は非常に反応性に富む不対電子をもったラジカル状態であるため、もう1分子のNOと速やかに反応することができ、それによりN2Oが産生されるメカニズムを確定できました。

この研究により、25年間未解決だった生物的N2O発生の分子機構の解明に終止符が打たれたことになります。

図2. NORの反応中間体の構造。

図2. NORの反応中間体の構造。

H原子の位置は時分割赤外分光法と量子化学計算により決定。N原子とO原子上のメッシュは、反応性に富む不対電子の分布。

本成果の意義
 冒頭で述べた通り、N2Oは今後の地球環境を考える上で非常に重要な気体です。

本成果は、微生物によるN2Oの排出量を抑制する上で重要な分子基盤になると考えられます。

また、本研究で開発した測定技術は、さまざまなケージド化合物と酵素の組み合わせに適用することが可能であり、高い機能をもつ生体触媒のしくみの理解など、今後の幅広い展開が期待されます。

 本研究は、科研費助成事業の基盤研究(S)「一酸化窒素の生体内動態の分子科学」、新学術領域研究(研究領域提案型)「生命金属動態に関与するタンパク質分子の構造機能ダイナミクス研究」、「時間分解構造解析を補完する精密顕微分光計測」、学術変革領域(A)「大規模・高精度な第一原理計算による超秩序構造の機能解明とデザイン」、理化学研究所Pioneering Project「動的構造生物学」などの支援を受けて実施されました。


用語解説

(注1) SACLA
理化学研究所と高輝度光科学研究センターが開発し、兵庫県の西播磨地区に設置されているX線自由電子レーザー(XFEL:X-ray Free Electron Laser)の施設の名称。

XFELは数フェムト秒(1フェムト秒は1,000兆分の1秒)の超短パルスで出力される超高輝度のX線のレーザーを示す。

(注2) 無損傷結晶構造解析
タンパク質が規則正しく並んだ結晶にX線を照射すると、X線の回折現象が起こる。回折されたX線の強度を計測して解析することで、タンパク質の構造を原子のレベルで可視化できるのがX線結晶構造解析である。

通常のX線結晶構造解析法では、一つの結晶に1分以上X線を照射して回折データを測定するため、その間にタンパク質の構造の一部にX線が損傷を及ぼす場合があることが知られている。

特に、金属を活性中心に含むタンパク質や不安定な反応中間体ではそのような損傷が顕著である。

XFELの超短・超高輝度X線パルスを用いると、回折現象がフェムト秒で完結するため、X線による損傷が顕在化する前の構造を捉えることができる。

X線パルスを照射するごとにタンパク質結晶を交換しながらデータ収集することによって、損傷のない(無損傷の)タンパク質の構造の決定が可能となる。

(注3) 時分割赤外分光法
分子は常に振動しており、その振動状態は分子内の電子分布(電子状態)を反映している。

分子に赤外光を照射すると、その分子の振動状態のエネルギーに対応する特定の波長の赤外光が吸収される。

すなわち、赤外分光法は、吸収される赤外光の波長から分子の振動状態を解析し、その分子の電子状態を明らかにする実験手法である。

時分割赤外分光法は、酵素反応の中間状態など不安定で短時間だけしか存在しない分子の電子状態の情報を得る手法で、紫外光や可視光などの光照射によって系に刺激を与えて反応を開始させてから、任意の時間経過後に赤外光を照射し、その吸収波長を観測する実験手法である。

(注4) ケージド化合物
通常は安定だが、光を照射すると、極めて短時間で小分子を放出する化合物の総称。ケージドNOは紫外光照射後数マイクロ秒(1マイクロ秒は100万分の1秒)で一酸化窒素NOを放出する化合物である。他にも、ケージド電子、ケージドプロトン、ケージドアミノ酸、ケージドATPなど、生体反応に関連する多くのケージド化合物がある。

(注5) ラジカル状態
不対電子をもった状態。安定な分子では、2つの電子が“つい”になっている。しかし、何らかの状況でその電子の対が保てなくなった分子、すなわち不対電子をもった状態の分子は、不安定で、反応性が高く(反応し易く)なっており、他の分子から1つ電子を奪って安定化しようとする性質をもつ。

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