【書き込みを読んで4】難波先生より

【書き込みを読んで4】
＜Unknown (Unknown) 2014-06-30 15:04
　相同染色体の片側のアレルでTCRに組換えを持つマウスがSCIDを発症するかどうか、という議論には決着がついていないと思うのですが、片側TCRアレルが組換えられたマウスが生存できない、という根拠を教えていただけますでしょうか？＞
　これはSTAP問題が発生した直後に明石市民病院の金川先生と議論した点です。
　2/18鹿鳴荘便りの「切り貼り？」の項をご覧下さい。
http://blog.goo.ne.jp/motosuke_t/e/acf759ed9b0efb782665fc514f576be4?fm=entry_awp
　ネイチャー論文図1iのDNA電気泳動の写真です。TCR遺伝子はレーン１（ES細胞）とレーン２(線維芽細胞)では陽極から動いておらず、germline(胚型)であることがわかります。レーン３（新生児マウスの脾臓から採取したTリンパ球）では、GL（胚細胞型遺伝子）位置にまったくDNAが認められません。この写真は相同染色体の両方のTCR遺伝子が再構成を行っていることを意味しています。この状態でSTAP幹細胞ができたとすれば、もう多様なTCR遺伝子を作成できないので、免疫不全のマウスが生まれるはずです。
　Ｔ細胞はＢ細胞をも支配していますから、細胞性免疫の不全だけでなく体液性免疫の不全をも、言い替えれば「重症複合免疫不全(SCID)」が起こり、子マウス生まれてもすぐに死んでしまうだろう、というのが私の考えです。
　議論はレーン３でＴ細胞のTCR遺伝子が完全に再構成を起こしているという事実に立ってのものです。

　ところがレーン４を見ると、消失したはずのGLがはっきり出ており、レーン５でもうっすらと出ています。テキストに書いてあることが事実なら、両方のTCR遺伝子でV-J-D遺伝子が再構成したものが、培養すると元に戻ることなどありえません。
　もし片側の遺伝子だけが再構成したのであれば、レーン３にはGLの位置にバンドがなければいけません。それならレーン４，５のバンドは説明可能です。しかし片側しか再構成されていないということは、片側だけで機能性遺伝子が発現しているということであり、この細胞を出発点として、片方の胚細胞型遺伝子だけを使って、Ｔ細胞の免疫学的多様性が獲得されるか大いに疑問があります。おそらく免疫遺伝の再構成を行う「再構成活性化遺伝子(RAG)」が上手く作用しない可能性が高いと思います。
　その後、この論文の図Iiの電気泳動の写真はレーン３が「はめ込み」と証明されました。同じメルマガの下の写真です。

　私は小保方論文の虚偽性を指摘するために、遺伝子再構成とSCIDの話を持ちだしたので、相同遺伝子の片方だけに免疫遺伝子の再構成が起こった細胞からキメラマウスを作ったらどうなるか、について確答はできません。（そんなマウスが作られたとは思いません。）しかし他方の免疫遺伝子が機能性であれば、そこからRAG遺伝子に信号が送られ、他方の胚細胞型遺伝子の再構成を抑制するだろうと考えます。
　間違いがあれば、証拠と共にご指摘下されば嬉しく思います。
　
　これについては
＜Unknown (Unknown) 2014-07-02 23:01
Unknown (Unknown) 様 2014-06-30 17:08
情報ありがとうございます。
挙げてくださったプレスリリースに該当する論文を読んでみたところ、末梢白血球をリンパ球とそれ以外に分離して体細胞クローンマウスを作成していました。リンパ球以外の分画からは正常に成熟したマウスが作成できたそうですが、リンパ球分画から作成した個体を３匹解析すると、B細胞由来であり、全て（よく分からない理由で）離乳前に死亡したそうです。N=3なので確言はできませんが、B細胞由来クローンが正常に発育できない可能性はあります。T細胞由来クローンについての情報はありませんでした。>
と、質問したご本人が他の方の回答で納得されているようですので、私が余計な口出しをする必要はありませんでした。