「ＰＣＲ」「メタゲノム解析」「培地」

🌸病原性ウイルスの研究１

⛳ＰＣＲ検査とは
　☆「感染症になったかもしれない」と思ったとき

　☆ＰＣＲ検査で感染症の病原体の存在調べる事が出来る

　＊ウイルス由来の核酸（ＤＮＡとＲＮＡ）を検出すれば病原体がわかる
　＊ＰＣＲは既知のウイルスを見つけ出すのに威力を発揮する

　☆ＰＣＲ法の実施方法
　＊ＤＮＡ配列上の特定の領域（目的領域）

　＊耐熱性ＤＮＡポリメラーゼを用いて増幅させる方法

　＊鋳型ＤＮＡが極微量でも存在していれば目的領域が増幅される

⛳ＰＣＲ法の実際

　☆３つのステップでＤＮＡを増幅する
　①熱変性（９４～９６℃）

　＊鋳型２本のDNAを熱により１本の鎖にする
　②アニーリング（５０～６８℃）
　＊温度を下げて、鋳型ＤＮＡにプライマーを結合させる

　③伸長反応
　＊温度を上げ（７０～７４℃）ＤＮＡを伸長させる
　☆反応を繰り返していくと

　＊１サイクルで目的のＤＮＡ配列が２倍に増幅される
　☆プライマーでウイルス特有の配列を指定すると

　＊特定のウイルスの配列のみを増やすことができる

　☆増えたＤＮＡ断片を電気泳動して移動度を調べれば

　＊サンプル中にウイルスが存在するかどうかわかる

　☆ＰＣＲで増やした断片をリアルタイムに高い特異度で調らべられる

⛳メタゲノム解析

　☆塩基配列を自動的に解読するＤＮＡシークエンサー
　＊高速に解読できる次世代シークエンサーが開発された

　☆細胞のゲノムＤＮＡ配列

　＊微生物の網羅的な探索に使われるようになった

　☆メタゲノムの「メタ」は「超える」という意味

⛳天才的な発明 固形増地
　☆病原体（この場合は細菌）を特定する場合

　＊検体から疑わしい病原体を単体で分離が必要

　☆細菌の数を増やすときは、固形培地あるいは液体培地を用いる

　＊培地には、細菌がよく育つ栄養が入っている

　☆培養液中に２種類以上の細菌がいる場合

　＊異なる細菌が混ざったままで増えてしまう
　☆細菌は２倍ずつに増えていく

　＊１つから２つに増えた細菌

　☆液体培地ではそれぞれ別の場所に、ブラウン運動で動いている

　☆固形培地では、2つに分裂した細菌は隣に留まる

　＊時間が経つとその場所で目に見えるコロニーになる
　＊個体なので、検体を平板培地に細く塗り広げることができる

　＊間違いなく細菌を単離できる

　☆単離できたら、液体培地で細菌を純粋に大量に増やす

　＊動物実験より「この細菌が病原体だ」と言うことができる

　☆寒天培地を発明したのは、コツホといわれている

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（敬称略）
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⛳出典、『なぜ私たちは存在するのか』

「ＰＣＲ」「メタゲノム解析」「培地」

（『なぜ私たちは存在するのか』記事他より画像引用）